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反相液相色譜法同時(shí)測(cè)定發(fā)酵乳中的蛋白糖和氨基酸

更新時(shí)間:2015-01-08瀏覽:1699次

 

◆ 說(shuō)明
蛋白糖(英文名aspartame,又名阿斯巴甜)是由氨基酸組成的二肽類(lèi)甜味劑。它具有類(lèi)似蔗糖的甜味,不致齲,不致肥,無(wú)任何副作用,是保健食品、飲料等的低卡甜味劑。單純測(cè)定蛋白糖或氨基酸的報(bào)道已有不少,而對(duì)蛋白糖的測(cè)定大多局限于對(duì)配制軟飲料中單種蛋白糖成分或?qū)κ称诽砑觿┤缟?、防腐劑等成分的檢測(cè)分析方面??紤]到在發(fā)酵乳制品中,氨基酸的種類(lèi)及含量是常被檢測(cè)用于評(píng)價(jià)其營(yíng)養(yǎng)性能的重要指標(biāo),而蛋白糖在降解過(guò)程中也會(huì)產(chǎn)生一些氨基酸,為此,我們探討了在測(cè)定氨基酸的同時(shí)測(cè)定蛋白糖含量的可能性。
◆ 分析條件
儀器:STI P5000梯度系統(tǒng)
色譜柱:Vertex AQ-C18,5μm,150mm×4.6mmI.D.
檢測(cè)器:STI UV5000紫外檢測(cè)器
流動(dòng)相:流動(dòng)相A:19.0 g NaAc·3H2O溶于1 L超凈水中,加0.5 mL三乙胺,用冰醋酸調(diào)pH至6.40,脫氣。洗脫液B:600 g/L乙腈。稀釋液:710 mg Na2HPO4加超凈水1 L,用100 g/L的V(磷酸)∶V(乙腈) =95∶5調(diào)pH值為7.4,過(guò)濾備用。
梯度程序:
時(shí)間(分鐘)   流速(min   流動(dòng)相A%V   流動(dòng)相B%V    
0.5            1.0              90                10
10.5            1.0              49                51
16.5            1.0               0               100
17.0            1.0               0               100
17.5            1.5               0               100
18.0            1.5              90                10
23.0            1.5              90                10
23.5            1.0              90                10
柱溫:28℃
檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm
流速:1.0 mL/min
 
◆ 譜圖
 
 
 
 
 
 
 
PTC-氨基酸、PTC-蛋白糖、衍生試劑產(chǎn)物的色譜圖
Chromatogram of amino acids,aspartame and derivatives
1.Asp, 2.Glu, 3.Ser, 4.Gly, 5.His, 6.Arg, 7.Thr,8.Ala, 9.Amonia, 10.Pro, 11.Tyr, 12.Val, 13.Met,14.Cys, 15.Ile, 16.Leu, 17.Phe, 18.Lys, 19.aspartame.
結(jié)論
用上海禾工VERTEX STI 5000梯度液相色譜儀同時(shí)測(cè)定發(fā)酵乳中的蛋白糖和氨基酸,方便,準(zhǔn)確,快速。
 

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